Estabelecimento de fungos nematófagos aplicados no campo para o controle dos nematoides-chaves dos citros no Brasil / Survival of nematophagous fungi establishment of applied in the field for the control of key citrus nematodes in Brazil

O monitoramento da sobrevivência de fungos nematófagos se torna necessária para estabelecer períodos de reaplicação de formulações de fungos nematófagos para controle dos nematoides dos citros a campo. Foram monitoradas a sobrevivência dos fungos: Arthrobotrys robusta, A. oligospora, A. musiformis, Dactylella leptospora e Monacrosporium eudermatum nas parcelas tratadas com 1; 2; 4; 6 L da formulação dos fungos/planta ou testemunha sem aplicação, durante o período de nove meses, sendo a primeira avaliação 6 meses após a aplicação e as demais com intervalos de três meses após a primeira avaliação. O fungo D. leptospora foi encontrado somente na avaliação de 6 meses após a aplicação dos tratamentos, indicado um tempo de sobrevivência curto no solo. Contudo, os isolados A. robusta, A. musiformis e A. oligospora foram recuperados em todas as avaliações e principalmente nas parcelas tratadas com as maiores doses da formulação e na testemunha. Monacrosporium eudermatum foi recuperado em todos os períodos avaliados e inclusive na avaliação da parcela testemunha nove meses após a aplicação. O fato da presença das espécies de Arthrobotrys e M. eudermatum nas parcelas testemunhas indica que já eram espécies nativas desse pomar

Monitoring the survival of nematophagous fungi is needed to establish periods of reapplication of formulations of nematophagous fungi to control the citrus nematode in the field. We monitored the survival of fungi: Arthrobotrys robusta, A. oligospora, A. musiformis Dactylella leptospora and Monacrosporium eudermatum in plots treated with 1, 2, 4, 6 liters of the formulation of fungi/plant or witness without the application, during the period of nine months with the first assessment six months after application and the other with intervals of three months after the first evaluation. The fungus D. leptospora was found only in the evaluation of 6 months after treatment application, indicated a short survival time in the soil. However, the isolated A. robusta, A. musiformis and A. oligospora were recovered in all evaluations and especially in plots treated with higher doses of the formulation and witness. Monacrosporium eudermatum was recovered in all experimental periods and even in assessing the witness portion of nine months after application. The fact of the presence of species of Arthrobotrys and M. eudermatum in control plots indicates that native species that were already orchard.

Candida parapsilosis complex water isolates from a haemodialysis unit: biofilm production and in vitro evaluation of the use of clinical antifungals

Candida parapsilosis, currently divided into three distinct species, proliferates in glucose-rich solutions and has been associated with infections resulting from the use of medical devices made of plastic, an environment common in dialysis centres. The aims of this study were (i) to screen for Candida orthopsilosis and Candida metapsilosis (100 environmental isolates previously identified as C. parapsilosis), (ii) to test the ability of these isolates to form biofilm and (iii) to investigate the in vitro susceptibility of Candida spp biofilms to the antifungal agents, fluconazole (FLC) and amphotericin B (AMB). Isolates were obtained from a hydraulic circuit collected from a haemodialysis unit. Based on molecular criteria, 47 strains were re-identified as C. orthopsilosis and 53 as C. parapsilosis. Analyses using a formazan salt reduction assay and total viable count, together with microscopy studies, revealed that 72 strains were able to form biofilm that was structurally similar, but with minor differences in morphology. A microtitre-based colorimetric assay used to test the susceptibility of fungal biofilms to AMB and FLC demonstrated that the C. parapsilosis complex displayed an increased resistance to these antifungal agents. The results from these analyses may provide a basis for implementing quality controls and monitoring to ensure the microbiological purity of dialysis water, including the presence of yeast.

Microscopia eletrônica de varredura de fungos nematófagos associados a Tylenchulus semipenetrans e Pratylenchus jaehni / Scanning electron microscopy of nematophagous fungi associated Tylenchulus semipenetrans and Pratylenchus jaehni

Microscopia Eletrônica de Varredura de Fungos Nematófagos Associados a Tylenchulus semipenetrans e Pratylenchus jaehni. Fungos nematófagos têm sido estudados como uma alternativa promissora para o manejo de nematóides dos citros. Isolados detectados em pomares de citros, principalmente do Estado de São Paulo, foram estudados no Laboratório de Microscopia Eletrônica de Varredura da FCAV/UNESP ­ Câmpus de Jaboticabal-SP. Este estudo teve por objetivo documentar ao microscópio eletrônico de varredura as estruturas morfológicas marcantes para a identificação das principais espécies de fungos nematófagos envolvidas no estudo e comprovar a patogenicidade dos isolados associados a T. semipenetrans e P. jaehni, a saber: Arthrobotrys oligospora, A. conoides, A. robusta, A. musiformis, Dactylella leptospora, Monacrosporium eudermatum e M. elegans. Os dados obtidos no nesse estudo confirmaram que a microscopia eletrônica de varredura é uma ferramenta eficaz para auxiliar no entendimento do modo de ação dos fungos nematófagos e revelar detalhes de suas estruturas reprodutivas e de captura, confirmando a patogenicidade dos isolados a T. semipenetrans e P. jaehni assim como confirmar a identificação de alguns isolados.

Nematophagous fungi have been studied as a promising alternative for the management of nematodes of citrus. This study had the objective of documenting by scanning electron microscopy the outslading morphological structures for the identification of the main species of nematophagous fungi involved in the study and proving the pathogenicity of the isolated ones associated with T. semipenetrans and P. jaehni, Isolated came from in citrus orchards, mainly in São Paulo State, were studied in the Laboratory of Scanning Electron Microscopy of FCAV/UNESP - Campus de Jaboticabal-SP. The data obtained in this study have confirmed that the scanning electron microscopy is an effective tool to assist in the understanding of way of action of the nematophagous fungi: Arthrobotrys oligospora, A. conoides, A. robusta, A. musiformis, Dactylella leptospora, Monacrosporium eudermatum and M. elegans and to reveal details of their reproductive structures and the capture, to confirm the pathogenicity of the isolated to T. semipenetrans and P. jaehni, as well as to confirm the identification of some isolated

Scanning electron microscopy of the corneal endothelium of ostrich / Microscopia eletrônica de varredura do endotélio da córnea de avestruz

The aim of this study was to examine the endothelial surface morphology and perform a morphometric analysis of the corneal endothelial cells of ostrich (Struthio camelus) using scanning electron microscopy. Polygonality, mean cell area, cell density and coefficient of variation of mean cell area were analyzed. The normal corneal endothelium consisted of polygonal cells of uniform size and shape with few interdigitations of the cell borders. Microvilli appeared as protusions on the cellular surface. The average cell area was 269±18µm² and the endothelial cell density was 3717±240cells mm-2. The coefficient of variation of the cell area was 0.06, and the percentage of hexagonal cells was 75 percent. The parameters evaluated did not differ significantly between the right and the left eye from the same ostrich. The results of this study showed that the ostrich corneal endothelial cells appear quite similar to those of the other vertebrates.

Objetivou-se examinar a superfície posterior do endotélio corneano e realizar análise morfométrica das células endoteliais da córnea de avestruz (Struthio camelus) valendo-se da microscopia eletrônica de varredura. Avaliaram-se o número de lados, a área celular média, a densidade celular e o coeficiente de variação da área celular. O endotélio corneano de avestruz constitui-se de células poligonais uniformes em tamanho e forma, e com poucas interdigitações das bordas celulares. Visibilizaram-se microvilosidades na superfície celular. A área celular média foi de 269±18µm² e a densidade celular foi de 3717±240 células mm-2. O coeficiente de variação foi de 0,06 e o percentual de células hexagonais de 75 por cento. Não foram observadas diferenças significativas entre os parâmetros avaliados entre os olhos esquerdo e direito. Este estudo demonstrou que o endotélio corneano de avestruz é semelhante ao descrito em outros vertebrados.

Patogenicidade in vitro de Monacrosporium robustum a Rotylenchulus reniformis / In vitro pathogenicity of Monacrosporium robustum to Rotylenchulus reniformis

O nematóide reniforme (Rotylenchulus reniformis) é um importante patógeno de importantes culturas brasileiras, tais como soja, algodão, feijão, caupi, maracujazeiro, mamoeiro, tomate e alface, entre outras. Dentre os fungos nematófagos com potencial de utilização comercial como agentes do controle biológico de nematóides, destacam-se espécies do gênero Monacrosporium. No presente estudo, avaliou-se, in vitro, a capacidade predatória e de parasitismo de Monacrosporium robustum ao nematóide reniforme. Em períodos de 24, 48 e 72 horas após, constatou-se que a percentagem de predação do nematóide pelo fungo foi de, respectivamente, 81,3, 99,9 e 100.

Microscopia eletrônica de varredura de duas espécies de Fannia Robineau-Desvoidy (Diptera, Fanniidae) / Scanning electron microscopy in two species of Fannia Robineau-Desvoidy, (Diptera, Fanniidae)

As espécies Fannia pusio Wiedeman, 1830 e Fannia trimaculata Stein, 1898 pertencem ao grupo canicularis e ao subgrupo pusio. Estas espécies são morfologicamente muito similares e geralmente são diferenciadas por uma fileira de cerdas no fêmur do terceiro par de pernas do macho. A análise com microscopia eletrônica de varredura mostrou na estrutura denominada "cellas", menor número de orifícios na superfície dorsal do ovo e, na superfície ventral, foi detectado menor rugosidade, ambos em F. trimaculata. Na larva, o estigma ou espiráculo protorácico é proeminente, onde F. trimaculata apresentou duas expansões tegumentares pequenas e sete longas de igual comprimento. Os machos de F. trimaculata apresentam uma fileira de cerdas localizadas mais externamente na faceta e, outra fileira de cerdas menores, a qual é ausente em machos de F. pusio, porém presente nas fêmeas de ambas as espécies.

Scanning electron microscopy evaluation of the interface of three adhesive systems

O objetivo deste estudo foi avaliar através de microscopia eletrônica de varredura a interface de três sistemas adesivos, Scotchbond Multi-Purpose®, Optibond® and Denthesive Bond II®. Os sistemas adesivos e suas respectivas resinas compostas foram aplicados no terço cervical do canal radicular dos incisivos e caninos permanentes humanos, de acordo com as intruções do fabricante. As amostras foram incluídas em resina acrílica, cortadas transversalmente ao canal radicular e perpendicularmente à interface resina-dentina e analisadas através de microscopia eletrônica de varredura. Os sistemas adesivos Scotchbond Multi-Purpose® (SBMP) and Optibond® (OPB) apresentaram algumas características similares, camada híbrida homogênea e penetração de resina na dentina intertubular e peritubular. Entretanto, os tags apresentaram diferenças morfológicas, o sistema adesivo SBMP apresentou tags mais longos e em maior quantidade que o OPB. O sistema adesivo Denthesive Bond II® não mostrou as mesmas características em sua interface. Os túbulos dentinários não foram abertos e a smear layer não foi removida, devido à ausência de condicionamento ácido prévio da dentina, prejudicando a formação da camada híbrida. A análise da camada híbrida por microscopia eletrônica de varredura revelou diferentes padrões de hibridização, sugerindo que a união dentina-sistema adesivo-resina composta é influenciada por muito fatores, além disso, a padronização do substrato dentinário é impossível.